Protocolo para detecção da mutação GSTP1
Protocolo de Amplificação
Sequências de Primers:
105F 5´ ACC CCA GGG CTC TAT GGG AA 3´
105R 5´ TGA GGG CAC AAG AAG CCC CT 3´
- Análise da amplificação em gel de agarose 1,5 %, 80 Volts, 20 minutos
- Tamanho do fragmento = 176 pb
Protocolo de Digestão
Bsma I – Biolabs®
Tampão Bsma I 8,0 µL
Bsma I (5000U/µL) 1,0 µL
Produto de PCR 9,0 µL
- Colocar em banho-maria a 55° C por 3 horas
- A análise da digestão deverá ser realizada em gel de poliacrilamida a 6%.